HE染色步驟： 

1、脫蠟，脫蠟二甲苯Ⅰ、Ⅱ各10分鐘，事先準備好蓋玻片。

2、覆水，100%（Ⅰ、Ⅱ）、90%、80%、70%酒精各5分鐘，自來水沖洗5分鐘×3。

3.、蘇木精染色5分鐘，根據染色情況，可以適當增加或減少染色時間，流水沖洗。 

4、5%乙酸分化1分鐘，流水沖洗，用吸管滴加乙酸，布滿玻片上的組織即可，分化后顏色變淺了一些，成為藍色。

5、返藍：返藍液，實驗室沒有，也可不用。

6、伊紅染色1分鐘，根據染色情況，可以適當增加或減少染色時間，流水沖洗。

7、脫水：70%、80%、90%、100%酒精各10秒，二甲苯1分鐘，可以在通風櫥自然晾干再封

片，約5分鐘左右。

8、滴上中性樹膠，封片，用吸管滴上一滴即可，盡量少滴，但壓片后要將組織全部覆蓋完，避免中間有氣泡。

he染色原理：

易于被堿性或酸性染料著色的性質稱為嗜堿性( basophilia )和嗜酸性( acidophilia )；而對堿性染料和酸性染料親和力都比較弱的現(xiàn)象稱為中性（neutrophilia)。

構成組織內蛋白質的氨基酸的種類很多，它們有不同的等電點。在普通染色法中，染色液的酸堿度為pH6左右，細胞內的酸性物質如細胞核的染色質、腺細胞和神經細胞內的粗面內質網及透明軟骨基質等均被堿性染料染色，這些物質稱為嗜堿性。

而細胞質中的其它蛋白質如紅細胞中的血紅蛋白、嗜酸粒細胞的顆粒及膠原纖維和肌纖維等被酸性染料染色，這些物質稱為嗜酸型。如果改變染色液的酸堿度，pH值升高時，則原來被酸性染料染色的物質可變?yōu)槭葔A性；pH值降低時，原來被堿性染料染色的物質則可變?yōu)槭人嵝浴?/p>

所以說染色液的pH值可以影響染色的反應。脫氧核糖核酸（DNA）兩條鏈上的磷酸基向外，帶負電荷，呈酸性，很容易與帶正電荷的蘇木精堿性染料以離子鍵結合而被染色。蘇木精在堿性溶液中呈藍色，所以細胞核被染成藍色。